脱敏组方抗Ⅰ型变态反应的实验研究
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【摘要】 目的 观察脱敏组方对Ⅰ型变态反应的影响，探讨其抗变态反应的作用机制。方法 离体豚鼠回肠分别经组胺和肥大细胞脱颗粒剂compound 48/80致敏后，加入不同浓度(1.4、2.8 kg/L)的脱敏组方,记录肠肌收缩的幅度。阳性对照药物分别为氯雷他定和酮替芬。结果 脱敏组方低剂量组和高剂量组均可抑制组胺诱发的肠肌收缩(t=2.194、3.325,P<0.05)及compound 48/80诱发的肠肌收缩(t=2.314、3.455,P<0.05)。结论 中药脱敏组方具有较好的抗Ⅰ型变态反应作用且具有量效依赖关系。
【关键词】 脱敏组方;超敏反应;回肠;豚鼠
脱敏组方由甘草、苦参、生地、荆芥、丹皮等16 味中药组成,临床用于治疗过敏性疾病取得了较好的疗效。为探讨其药理作用机制,本实验对脱敏组方抗Ⅰ型变态反应的药理作用进行了研究,旨在为临床应用提供实验和理论依据,现将结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 动物来源
豚鼠20只,体质量400～450 g,雌雄各半, 均由青岛市动物实验中心提供。
1.2 药品与试剂
脱敏组方取自我院,按处方配齐药物140 g,加入1 kg冷水泡1 h后，文火煎20 min，过滤，继续用文火煎滤液至100 mL，即得含生药1.4 kg/L的低剂量脱敏组方;相同方法煎滤液至50 mL，即得含生药2.8 kg/L的高剂量脱敏组方。氯雷他定片由上海先灵葆雅制药有限公司生产,批号：071039;酮替芬由山东省莒南制药厂生产,批号：070101;Compound 48/80由SIGMA公司生产，批号：07093;组胺二磷酸盐由上海丽珠东风生物技术有限公司生产，批号：071117, 其他试剂均为国产分析纯。
1.3 仪器
XWT?464 型台式自动平衡记录仪(上海大华仪表厂)、 纵行玻璃恒温灌流肌槽(天津)、JZ2BK肌肉张力换能器(贝科测定设备有限公司)
1.4 方法
豚鼠禁食24 h后击其头部使其昏迷, 剖开腹腔,以胃幽门与十二指肠交界处为起点,取20～30 cm的肠管,去除肠管的脂肪和肠系膜,用丝线结扎肠两端,剪刀截取中间部分肠管,放入充氧的37 ℃台氏液中漂洗干净,将其截为2～3 cm长的肠段, 两端结扎，一端系于通气钩上，另一端系于换能器上。置入盛有30 mL 台氏液的恒温平滑肌槽中水浴,保持槽内温度恒定在37 ℃,通氧气，调节充氧流量，以不影响肠肌的自由收缩为宜。给予标本1.0 g 的基础负荷,采用等长收缩的形式,通过张力换能器输入二道生理记录仪。空白对照组:调节恒温平滑肌槽内肠肌张力,待舒缩稳定后,描记2 min肠肌正常运动曲线, 测量肠肌收缩幅度值。组胺致敏组：在描记2 min肠肌正常运动曲线以后,加入0.2 mg/L的组胺溶液0.1 mL, 使回肠达到最大兴奋性收缩,稳定后描记2 min运动曲线, 测量肠肌收缩幅度值。脱敏组方低剂量Ⅰ组: 在组胺致敏的基础上再加入低浓度脱敏组方(1.4 kg/L)0.1 mL, 同时描记2 min稳定后的肠肌运动曲线，测量肠肌收缩幅度值。 脱敏组方高剂量Ⅰ组:肠肌收缩幅度值测量方法同低剂量Ⅰ组,但加入高浓度脱敏组方(2.8 kg/L)0.1 mL。氯雷他定组:方法同前, 加入的氯雷他定浓度为0.5 kg/L。 Compound 48/80致敏组：方法同前加入4.5 kg/L的Compound 48/80溶液0.1 mL。脱敏组方低剂量Ⅱ组: Compound 48/80致敏的基础上，再加入低浓度的脱敏组方(1.4 kg/L)0.1 mL。脱敏组方高剂量Ⅱ组:方法同低剂量Ⅱ组, 加入高浓度脱敏组方(2.8 kg/L)0.1 mL。酮替芬组:方法同前, 加入的酮替芬浓度为0.4 kg/L。
2 结果
2.1 脱敏组方对组胺兴奋离体回肠收缩幅度影响
本文空白对照组、组胺致敏组、脱敏组方低剂量Ⅰ组、脱敏组方高剂量Ⅰ组以及氯雷他定组的`离体回肠收缩幅度分别为(11.45±0.75)、(29.05±0.35)、(14.75±0.67)、(12.54±0.94)、(12.31±0.61)mm。其中脱敏组方低剂量Ⅰ组、脱敏组方高剂量Ⅰ组、氯雷他定组的收缩幅度值较组胺致敏组降低(t=2.194～3.325，P<0.05), 脱敏组方高剂量Ⅰ组、氯雷他定组的收缩幅度值较脱敏组方低剂量Ⅰ组降低(t=3.780、3.561，P<0.05),脱敏组方高剂量Ⅰ组与氯雷他定组收缩幅度值比较无统计学意义(t=1.835，P>0.05)。
2.2 脱敏组方对Compound 48/80兴奋离体回肠收缩幅度的影响
Compound 48/80致敏组、脱敏组方低剂量Ⅱ组、脱敏组方高剂量Ⅱ组及酮替芬组的离体回肠收缩幅度值分别为(31.15±0.65)、(15.01±0.73)、(12.77±0.79)、(12.89±1.16) mm。其中脱敏组方低剂量Ⅱ组、脱敏组方高剂量Ⅱ组以及酮替芬组的收缩幅度值均较Compound 48/80致敏组降低(t=2.314～3.455，P<0.05), 脱敏组方高剂量Ⅱ组、酮替芬组较脱敏组方低剂量Ⅱ组均降低(t=3.169、3.075，P<0.05),脱敏组方高剂量Ⅱ组与酮替芬组比较无显著性(t=1.976，P>0.05)。
3 讨论
Ⅰ型变态反应又称Ⅰ型超敏反应,是IgE 抗体介导的速发型变态反应，在临床上比较常见。组胺的受体分型有3类：H1和H2受体分布于中枢组胺能神经元及外周的胃肠、气管、子宫、血管平滑肌等组织中，H3受体主要分布于中枢组胺能神经元内，在外周组织分布密度较低[1]。组胺能引起血管扩张，通透性增加[2]。本文结果显示，脱敏组方高剂量Ⅰ组对组胺引起的回肠收缩的抑制作用与氯雷他定组相当，脱敏组方低剂量Ⅰ组的作用强度弱于氯雷他定组。说明脱敏组方通过竞争性结合组胺受体，从而拮抗组胺作用于相应靶器官所引起的一系列炎症效应，且具有量效依赖关系。
Compound 48/80为N?甲氧苯胺和甲醛的缩合物，作为一种非特异性触发剂，它作用于细胞膜上相应的受体，通过改变肥大细胞膜的通透性或其他机制诱导组胺等过敏递质的释放。本文结果显示，脱敏组方高剂量Ⅱ组对Compound 48/80引起的回肠收缩的抑制作用与酮替芬组相当，脱敏组方低剂量Ⅱ组的作用强度弱于酮替芬组。说明脱敏组方可以通过减少非特异性抗原Compound 48/80直接诱导的肥大细胞释放组胺来发挥抗过敏反应的作用，且具有量效依赖关系。
中药复方制剂脱敏组方临床上用于治疗荨麻疹、湿疹等变态反应性皮肤病取得较好的效果。此方中甘草的有效成分甘草甜素有抗过敏、抑制肥大细胞脱颗粒的作用,对补体的两条激活途径都有抑制作用。甘草根茎及糖甙有抗乙酰胆碱和组胺的作用,还有糖皮质激素样作用。苦参中的氧化苦参碱具有明显抑制变应原诱导的肥大细胞脱颗粒作用,能降低细胞膜的流动性,稳定细胞膜。
综上所述,由这些药物组成的脱敏方剂具有抗Ⅰ型变态反应的药理作用，可在临床上推广应用。
【参考文献】
[1]匡荣,安宁飞,刘玉兰. 组胺研究进展[J]. 中国药理学通报, 2000,16(15):501?503.
[2]李侠. 三联疗法治疗慢性荨麻疹86 例临床分析[J]. 青岛大学医学院学报, 2007,43(6):544.
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