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神经外科病房呼吸道感染病原菌分布及药敏
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神经外科病房呼吸道感染病原菌分布及药敏【1】
摘要：目的 研究分析神经外科病房患者呼吸道感染常见的病原菌及其耐药性，为临床合理使用抗菌药物提供依据。
策略 收集2013年3月～2014年2月，我院神经外科住院患者1082份呼吸道标本，按相应要求分离鉴定病原菌，并进行药敏试验，统计所分离病原菌的分布及耐药性。
结果 我院检出病原菌639株，阳性率59.1%。
其中革兰阴性杆菌583株，革兰阳性球菌36株，真菌20株。
G-杆菌对氨苄西林等抗菌药物均有较高的耐药率，但对亚胺培南等敏感性较高。
G+球菌对青霉素类抗菌药物均耐药，但对万古霉素等保持高度敏感率。
白色念珠菌对抗真菌药物敏感性好。
结论 神经外科病房呼吸道感染病原菌以革兰阴性杆菌为主，对常用抗菌药物耐药性高，定期进行药敏试验和耐药趋势分析，对合理选择抗菌药物具有重要指导作用。
关键词：神经外科;呼吸道感染;药敏分析;病原菌
目前市场上抗生素种类多，更新快，抗生素大量使用造成耐药菌日趋增长，耐药菌感染是医院感染的主要理由[1-2]。
本文总结了2013年3月～2014年2月，我院神经外科住院患者呼吸道标本所分离病原菌的分布及耐药性，对于指导临床医师合理选择抗菌药物及减少医院感染具有重要作用[3]。
1资料与策略
1.1细菌来源 收集我院2013年3月～2014年2月神经外科住院患者呼吸道标本1082份。
质控菌株：ATCC25922(大肠埃希菌)、ATCC27853(铜绿假单胞菌)、ATCC29213(金黄色葡萄球菌)，购自卫生部临床检验中心。
1.2试剂 药敏纸片购自北京天坛药物生物技术公司，培养基为郑州安图绿科生物工程公司产品。
1.3策略 首先对痰标本进行涂片检查，符合要求的进行培养。
仪器是西门子WALK AWAY96全自动细菌鉴定及药敏分析仪，并使用该仪器原配的鉴定板，所有过程按照标准操作规程严格进行。
2结果
2.1病原菌分布情况 我院神经外科呼吸道标本总数1082份，其中检出病原菌639株，阳性率59.1%。
以革兰阴性杆菌为主，占91.2%，其次是革兰阳性球菌和真菌，见表1。
2.2 病原菌药敏实验结果 革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌的药敏试验结果，见表2、表3。
3讨论
神经外科呼吸道感染病原菌阳性检出率较高，以革兰阴性菌为主，而革兰阳性菌和真菌所占比例较小，该结果与报到文献类似，只是各病原菌构成比稍显不同[4]。
根据药敏试验分析，G-杆菌对临床常用的氨苄西林、哌拉西林、头孢唑林、头孢曲松、四环素、复方新诺明等抗菌药物均有较高的耐药率，目前对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦敏感性较高，但随着临床应用的增加会出现较多耐药菌株，因此临床要特别关注多重耐药菌。
G+球菌中金黄色葡萄球(MRSA)的比例也较高，该菌株对所有β-内酰胺类药物均耐药，不论药敏结果如何，临床使用均无效。
真菌感染呈上升趋势，提示临床医生对长期大量使用抗生素患者要注意预防。
加强病原学及耐药监测，对医院感染和临床用药具有指导作用。
参考文献：
[1]凌宙贵，刘卫，蒋连强，等.下呼吸道感染病原菌分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志，2013，23(014)：3545-3547.
[2]牛瑞超，罗百灵，张立，等.近16年呼吸科病房下呼吸道细菌感染的病原体变迁，分布及药敏差异[J].临床肺科杂志，2013，18(2)：247-250.
[3]李凤娥，曹银芳，燕成岭.下呼吸道感染病原菌的临床分布与耐药性研究[J].中华医院感染学杂志，2013，23(3)：689-691.
[4]牛瑞超，罗百灵，张立，等.呼吸科普通病房和呼吸重症加强治疗病房下呼吸道感染病原体的分布及药敏差异[J].中国呼吸与危重监护杂志，2013，12(2)：124-128.
微波消解—ICP—MS法测定壮药美巧杯中5种重金属的含量【2】
【摘要】目的：建立电感耦合等离子质谱(ICP-MS)法测定壮药美巧杯中铅、镉、砷、汞、铜5种重金属含量的策略。
策略：样品经混合酸微波消解后，用电感耦合等离子体质谱仪测定壮药美巧杯中铅、镉、砷、汞、铜5种重金属的含量。
结果：该策略对各元素的检出限为00048～00518ng/ml，回收率为87%～97%，国家标准物质茶叶(GBW10016)的测定值和标准值基本吻合。
结论：所建立的策略快速、准确、灵敏度高，可用于测定壮药美巧杯中5中重金属的含量。
【关键词】壮药;美巧杯;重金属;电感耦合等离子体质谱法;微波消解
铅、镉、砷、汞、铜是目前公认对人体有害的重金属元素，在人体内蓄积至一定量时可引起免疫系统障碍和多种功能损害，并影响人体的新陈代谢及正常的生理功能[1-3]。
而壮药中重金属的含量理由已是确保壮药“安全、有效、可控”的首要理由之一。
然而由于环境污染加剧，药材种植常使用大量化肥、农药等，导致壮药重金属含量超标较为常见。
因此建立一种快速、简便、准确、环保的壮药中重金属的测定策略十分必要。
重金属元素的测定策略主要有原子吸收光谱法 [4-5]、原子荧光法[6-8]、电感耦合等离子体发射光谱(ICP-AES)[9-12]、电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)[13-16] 、X 射线荧光光谱法[17]等。
其中ICP-MS法克服了传统策略的大多缺点，具有较高的灵敏度，干扰小，可同时快速测定多种元素的优点，目前应用较广泛。
本试验采用微波消解-ICP-MS法同时测定壮药美巧杯中铅、镉、砷、汞、铜5种重金属的含量，不但可作为壮药材美巧杯重金属安全性评价的依据，而且可为壮药美巧杯临床用药的安全提供参考。
1仪器与材料
11仪器电子分析天平(瑞士Mettler AE240)，7700型电感耦合等离子体质谱仪(美国Agilent公司)，Multiwate3000高性能微波样品制备仪(奥地利Anton Paar公司)。
12材料铅、镉、砷、汞、铜元素标准溶液浓度均为1000μg/ml，购于国家钢铁材料测试中心钢铁研究总院及中国计量科学研究院;内标混合液浓度为100μg/ml，由美国Agilent公司提供，使用前用一级纯化水稀释100倍;过氧化氢、硝酸均为优级纯;水为纯化水。
10批美巧杯样品均收集于广西，其原植物经本所黄桂华副主任药师鉴定为大戟科植物白桐树Claoxylon polot(Burm) Merr[C Indicum(Reinew ex Blume) Hassk]，样品批号、收集地点为：20101102(广西隆安县龙虎山);20101124(广西南宁高峰林场);20110506(广西南宁市郊双定村);20110513(广西隆安县龙虎山自然保护区);20101125(广西隆安县屏山乡雅力村);20101126(广西大新县全茗镇灵熬村);20110221(广西靖西县);20110310(广西柳江县);20110325(广西金秀县);20110326(广西三江县)。
2策略与结果
21供试品溶液的制备称取供试品粉末05g置消解罐中，精密加入5ml硝酸、2ml过氧化氢，盖好安全阀后，将消解罐放入消解系统中，按照表1设置微波消解条件消解样品，消解完毕后，用一级纯化水将内容物转入50ml量瓶中并定容至刻度，混匀。
同法制备试剂空白溶液。
22仪器参数条件ICP-MS仪器的工作参数为仪器全自动调谐优化给出，满足仪器安装标准要求的灵敏度、背景、氧化物、双电荷、稳定性等各项指标，经调谐后的仪器参数设置如表2所示。
23策略学考察
231内标及同位素的选择试验内标及待测元素同位素的选择依照2010年版《中国药典》(一部)规定的策略[18]，选63Cu、75As、114Cd、202Hg 、208Pb及作为待测同位素，其中所选72Ge作为63Cu、75As的内标元素，115In作为114Cd的内标元素，209Bi作为202Hg 、208Pb的内标元素。
232标准曲线的制定及检出限的确定分别量取铅、镉、砷、汞、铜元素标准溶液适量，用10%硝酸溶液(V/V)逐级稀释成含Pb、Cd、As浓度为0、25、5、10、20ng/ml;Cu浓度为0、50、100、200、400ng/ml;Hg浓度为0、05、1、2、5ng/ml的混合标准溶液系列。
以相应元素的浓度为横坐标，以相应元素与所选内标元素响应值比——相应离子每秒计数值(CPS)比为纵坐标，绘制标准曲线。
重复测定空白溶液11次，得出5种元素的检出限。
各元素的回归方程和检出限见表3。
233精密度试验将混合标准品溶液(Pb、Cd、As各25ng/ml，Hg 05ng/ml，Cu 50ng/ml)，连续进6针，计算RSD分别为：25%、163%、262%、36%、325%。
234重复性试验取样品批号为20101102的供试品溶液，平行测定6次，计算RSD分别为：672%、234%、492%、823%、315%。
234回收率试验取已知含量的样品(批号为20101102)粉末6份，每份05g，分别置消解罐中，精密加入铅、砷标准溶液各05μg、镉标准溶液025μg、铜标准溶液10μg、汞标准溶液0015μg及5ml硝酸、2ml过氧化氢，盖好安全阀后，将消解罐放入消解系统中，按照表1设置微波消解条件消解样品，消解完毕后，用一级纯化水将内容物转入50ml量瓶中并定容至刻度，混匀，即得。
各元素平均回收率见表4。
235标准物质茶叶(GBW10016)的分析取国家标准物质茶叶(GBW10016)6份，按“21”项下的策略操作，对铅、镉、砷、汞、铜元素含量进行测定，结果见表5。
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