正常结膜囊带菌情况
正常结膜囊带菌情况
【摘要】 目的：调查不同人群正常结膜囊带菌情况及其对常用抗生素的敏感情况。
方法：对未使用任何滴眼液和抗生素的200名受调查者，常规眼科检查排除泪囊、眼表、前节疾病后，进行结膜囊细菌培养和药物敏感试验。
结果：在全部受调查者中，细菌培养阳性率为43.00%，共培养出15个菌种103个菌株;葡萄球菌最多，共51株(占49.51%)，其中表皮葡萄球菌47株(45.63%)，金黄色葡萄球菌2株(1.94%);类白喉杆菌次之，共40株(38.83%)。
>55岁人群结膜囊带菌率明显高于≤55岁人群，农村人群高于城市人群，均差异显著(P<0.05)。
药物敏感试验显示大部分菌株对目前常用抗生素耐药。
结论：正常结膜囊可以带有细菌。
内眼手术前应选用敏感抗生素以预防术后感染的发生。
【关键词】 结膜囊; 细菌培养; 药物敏感试验
[Abstract] Objective： To investigate the positive rate of bacterial culture of normal conjunctival sac and the sensitivity to commonly used antibiotics among different kinds of people.
Methods: Samples were collected and separated from conjunctival sac of 200 normal eyes of 200 subjects and they accepted no eye drops or antibiotic treatment. Regular eye examinations were performed to exclude the lacrimal sac inflammation, ocular surface diseases and anterior segment eyes diseases.
The samples were cultured and their sensibilities to antibiotics were tested. Results: Bacterial positive rate was 43.00% in 200 eyes.There were 103 strains of bacteria belonging to 15 species.
The most prominent bacterium was staphylococcus(51 strains, 49.51%), in which there were 47 strains of staphylococcus epidermis(45.63%) and 2 strains of staphylococcus aureas(1.94%). The next was corgebacterium(40 strains, 38.83%).
The elder person(more than 55 years old ) showed a significant higher bacterial positive rate(P<0.05). And the people from city had a significant lower bacterial positive rate than those from contryside(P<0.05).
Most of the bacteria were not sensitive to commonly used antibiotic drugs. Conclusion: Bacteria may be exist in normal conjunctival sac. Using susceptible antibiotic drugs before eye surgery is suggested to take precautions against the infection.
[Key words] conjunctival sac; bacterial culture; drug sensitivity test
正常人结膜囊可分离出正常菌群或条件致病菌，在外伤、手术等条件下，结膜囊的细菌可能导致眼内炎的发生。
感染性眼内炎一旦发生，可以引起眼球的严重破坏和视功能丧失，甚至需要摘除眼球。
因此了解人群中结膜囊内菌种的分布与变化，对眼科内眼手术前合理选择抗生素以预防术后细菌感染性眼内炎的发生有着重要的指导意义。
本研究对正常人结膜囊进行细菌培养及药物敏感试验，并对结果进行分析，以期发现正常人结膜囊细菌分布和药物敏感情况，为临床用药提供依据，现将结果报告如下。
1 对象与方法
1.1 对象
随机选择2009年10月至12月间中大医院眼科门诊、住院的患者或家属、部分工作人员共200例200只眼，均自愿接受调查。
其中男性87例，女性113例;右眼94例，左眼106例;年龄9～90(平均56.51)岁，≤55岁者76例，>55岁者124例。
受试者采样前1个月内未使用任何滴眼液和抗生素，常规眼科裂隙灯检查排除眼睑、眼表、眼前节病变，泪道冲洗排除泪囊炎症。
1.2 采集方法
取材均由专职眼科医生进行，取材地点常规定期行紫外线消毒。
取材时嘱受试者向上方注视，用左手大拇指和食指分开眼睑，充分暴露下方结膜囊，右手用无菌棉拭子放入结膜囊内，轻轻扭转擦拭取材，自一侧到另一侧;取材时注意不遗漏内眦部，且棉拭子不触及睫毛或睑缘等以避免污染。
1.3 细菌鉴定与药敏试验
将已采集标本的棉拭子涂布划线于哥伦比亚血琼脂平板上，然后将标本置于37 ℃恒温CO2细菌培养箱中培养，48 h后观察细菌生长情况，无细菌生长者为阴性，有细菌生长者为阳性。
细菌菌种鉴定通过美国德林公司MicroScan微生物自动鉴定/药敏分析系统Walkaway?40或法国生物梅里埃公司VITEK2细菌自动鉴定分析仪进行，同时检测各种抗生素的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration，MIC)。
药物敏感试验根据美国国家临床实验标准委员会(national committee for clinical laboratory standards，NCCLS)标准进行。
1.4 统计学处理
采用SPSS 13.0软件包进行统计学处理，计数资料行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 结膜囊细菌培养情况
送检200份标本中，阳性86例，阴性114例，阳性率为43.00%。
单眼同时检出2种细菌者17例。
共培养出阳性细菌103株，分属15个菌属。
阳性菌株主要是革兰阳性细菌，占92.23%，其中表皮葡萄球菌最多，共47株(占45.63%);类白喉杆菌次之，共40株(占38.83%)。
革兰阴性菌少见，占7.77%。
正常结膜囊检出细菌的分布见表1。
表1 正常结膜囊检出细菌菌株的分布情况
2.2 结膜囊细菌培养结果与性别的关系
200例调查者中男性87例，其中35例为阳性，阳性率为40.23%;女性113例，其中51例为阳性，阳性率为45.13%。
经 χ2检验， χ2=0.482,P=0.487，差异无统计学意义。
2.3 结膜囊细菌培养结果与年龄的关系
200例调查者中≤55岁者76例，其中26例为阳性，阳性率为34.21%;>55岁者为124例，其中60例为阳性，阳性率为48.39%。
经 χ2检验， χ2=3.864,P=0.049,差异有统计学意义。
2.4 结膜囊细菌培养结果与眼别的关系
200例调查者中右眼94例，其中38例为阳性，阳性率为40.43%;左眼106例，其中48例为阳性，阳性率为45.28%。
经 χ2检验， χ2=0.480,P=0.489，差异无统计学意义。
2.5 结膜囊细菌培养结果与居住地的关系
200例调查者中居住农村者为82例，其中58例为阳性，阳性率为70.73%;居住市区者118例，其中28例为阳性，阳性率为23.73%。
经χ2检验， χ2=43.609,P=0.000,差异有统计学意义。
2.6 结膜囊细菌药敏试验
大多数革兰阳性菌对临床常用的青霉素、红霉素、头孢唑啉及氯洁霉素耐药，对万古霉素、利福平、达福普汀及呋喃妥因等敏感。
革兰阴性菌检出率低，对大部分抗生素如氨苄青霉素、头孢第3代、左氧氟沙星等较为敏感。
3 讨 论
细菌在自然界中广泛存在，结膜囊是一个与外界相通的腔隙，长期暴露于自然界中，出生不久就可以有细菌共生，并随生活环境、年龄的变化而不断变化。
正常人眼睑、睑缘处常有表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、微球菌等寄生。
正常人结膜囊可无细菌(约30%)或暂时存在少数表皮葡萄球菌、甲型链球菌、类白喉杆菌、丙酸杆菌，偶见卡他球菌、金黄色葡萄球菌、肠道细菌等。
长期使用广谱抗生素、激素等情况下，正常菌群比例关系发生改变，或耐药菌株转为优势，表现为菌群失调。
眼科诊疗中耐药菌株感染、条件致病菌感染，特别是革兰阴性杆菌感染已日益突出[1]。
文献报道正常结膜囊的细菌带菌率为20.6%～98.8%[2-3]不等，最常见的细菌有表皮葡萄球菌和棒状杆菌(占25%以上)，痤疮丙酸杆菌及金黄色葡萄球菌占5%～15%不等[4]。
曾树森等于2007年报道397例正常人结膜囊细菌培养阳性率为21.2%，前3位为表皮葡萄球菌(51.2%)、金黄色葡萄球菌(11.9%)、棒状杆菌属(7.1%)[5]。
孙士营等[6]于2005年对1 733例眼部无感染的白内障者术前进行结膜囊细菌培养，阳性率为51.6%，主要为革兰阳性球菌(81.4%)和革兰阴性杆菌(12.9%)，其中表皮葡萄球菌最多。
本组人群中共培养出阳性细菌103株，15个菌属，细菌培养阳性率为43.00%，位于前3位的分别是表皮葡萄球菌(45.63%)、类白喉杆菌(38.83%)和金黄色葡萄球菌(1.94%)，这与大部分文献报道相符。
此外我们还检出了不很常见的草绿色链球菌、腐生葡萄球菌、肺炎链球菌、粪肠球菌等革兰阳性球菌，以及大肠埃希菌、阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌、洛菲不动杆菌、产碱杆菌属、耐放线不动杆菌、克氏柠檬酸杆菌等革兰阴性菌。
本次调查中，≤55岁者结膜囊带菌率为34.21%，>55岁者带菌率为48.39%，后者高于前者，且差异有统计学意义(P<0.05)，这种差异可能与老年人抵抗力下降、泪膜稳定性差以及泪液中抗体、补体、乳铁蛋白等降低有关。
农村人群结膜囊带菌率为70.73%，明显高于城市人群(23.73%)(P<0.05)，分析可能与两组人群的居住环境、卫生习惯和卫生状况不同有关。
通常认为正常人眼部的这些菌属为条件致病菌，无致病性或偶有致病性，现在已有条件致病菌成为化脓性眼内炎首要致病菌的报道[7]。
由于眼泪的清洗作用和溶菌酶的溶菌作用，正常结膜囊内的细菌数量通常很少，当结膜与角膜上皮完整时，起到一个屏障作用，一般不会出现感染。
而术后，由于创伤，某些条件致病菌可引起伤口感染，导致眼内炎的发生，且一旦发生，可严重损害患者的视力。
有文献报道在细菌性眼内炎、细菌性角膜溃疡、睑缘炎、结膜炎等眼部感染性疾病中，表皮葡萄球菌占多数[1，8]，这与我们检测出正常结膜囊中表皮葡萄球菌占多数是一致的'，可见条件致病菌与致病菌之间并没有本质上的区别。
而随着眼内人工晶体植入、阀门管植入、玻璃体切割等手术的广泛开展，表皮葡萄球菌的致病性也日益受到重视，现已成为白内障人工晶体植入后慢性眼内炎、眼外伤、内眼手术后眼内感染的常见致病菌[9-10]。
故对于术前结膜囊分离出表皮葡萄球菌者应予重视，尤其是老年人，由于抵抗力低下，由表皮葡萄球菌引起手术后感染的可能性较大，而且易产生耐药菌株，治疗上较为棘手。
绿脓杆菌这种在眼部感染中致病力较强的病菌随着角膜屈光手术的广泛开展感染发生率有所增加[11]，但我们这次调查中未检测到该菌，分析可能与绿脓杆菌在正常人眼中存在率极低，而本研究的调查例数相对较少有关。
目前眼部及全身使用的抗生素种类繁多，我们选用临床常用的抗生素分别对检出的革兰阳性和阴性细菌进行药物敏感试验，结果表明，培养出的阳性菌大多数对临床常用的青霉素、头孢唑啉、红霉素、氯洁霉素耐药，对万古霉素、呋喃妥因、利福平等敏感，检出率最多的表皮葡萄球菌对临床常用的青霉素、红霉素、氯洁霉素和氧氟沙星产生耐药菌株。
正常结膜囊细菌对临床常用抗菌药物耐药性高，但对不常用抗生素耐药性低，表明细菌耐药性的发生与临床用药密切相关，大量广泛使用抗生素将导致结膜囊内正常的细菌对这些抗生素的耐药性增加[12]。
所以，在使用抗生素滴眼液时，要严格掌适应证，避免滥用抗生素。
总之，我们关于正常结膜囊细菌带菌及药物敏感情况的调查提示，内眼手术前应选用敏感抗生素以预防术后感染的发生。
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