毛冬青活性化学成分的提取分离研究的对护理学认识论文

毛冬青活性化学成分的提取分离研究的对护理学认识论文

　　1 仪器与材料

　　JASCO V?550紫外可见分光光度仪；JASCO FT/IR?480 Plus Fourier Transform型红外光谱仪（KBr压片）；BRUKER AV?400 FT型核磁共振仪；Finnigan LCQ Advantage MAX型质谱仪。柱层析用硅胶为青岛海洋化工厂产品；硅胶GF254薄层预制板为烟台化学工业研究所产品；Sephadex LH?20为Pharmacia 公司生产；所用试剂为化学纯或分析纯。所用药材由温栢清先生采自广东省从化市溪流河林场，由暨南大学药学院周光雄教授鉴定为毛冬青Ilex pubescens Hook. et Arn.，植物标本（2008071101）保存于暨南大学药学院标本室。

　　2 方法

　　2.1 提取与分离

　　毛冬青的干燥根5 kg，粉碎后经70 %乙醇渗漉提取，提取液减压浓缩得稠浸膏，浸膏用水稀释，以大孔吸附树脂柱进行色谱分离，用蒸馏水及20%，50%，95%乙醇溶液梯度洗脱。分别得到水洗脱物130 g，20%乙醇洗脱物45 g，50%乙醇洗脱物120 g及95%乙醇洗脱物266 g。将50%和95%乙醇洗脱部分分别用硅胶、ODS及SephadexLH?20柱进行分离纯化， 从50%乙醇洗脱部分分离得到化合物3 （4 mg），4 （30 mg），5 （15 mg），6 （200 mg），7 （2 mg），8 （2 mg），9 （3 mg）和10 （2 mg），从95%乙醇洗脱部分分离得到化合物1 （6 mg），2 （6 g），11（5 mg）和12 （8 mg）。

　　2.2 结构鉴定

　　2.2.11 化合物

　　无色片状结晶（甲醇），mp 141～142 ℃ （石油醚）。溶于石油醚、氯仿、醋酸乙酯。Liebermann?Burchard反应呈阳性，薄层色谱Rf值与β?谷甾醇对照品一致，且与β?谷甾醇对照品混合后熔点不下降，因此鉴定化合物11为β?谷甾醇（β?sitosterol）。

　　2.2.12 化合物

　　白色无定形粉末（甲醇），mp 280 ～ 281 ℃（甲醇），溶于DMSO、吡啶、难溶于CHCl3、 CH3OH等，Liebermann?Burchard反应和Molish反应均呈阳性，薄层色谱的Rf值与β?胡萝卜苷对照品一致，且与β?胡萝卜苷对照品混合后熔点不下降，因此鉴定化合物12为β?胡萝卜苷（β?daucosterol）。

　　毛冬青主产于我国广东、广西、福建、江西等地，是我国华南一些地区民间常用要药，具有活血通络、清热解毒之功效，用于治疗冠心病、心绞痛、脉管炎、缺血性中风等疾病［1］ 。现代研究表明毛冬青注射液具有抗病毒、抗血栓、抗肿瘤之功效，而生物活性研究目前主要集中在毛冬青甲素和毛冬青酸等单体化合物上，对其他化学成分的研究仍存在不足或缺乏。

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