气相色谱法测定角鲨烯软胶囊中角鲨烯含量

  气相色谱法测定角鲨烯软胶囊中角鲨烯含量【1】

  【摘要】 目的 建立角鲨烯软胶囊中角鲨烯的气相色谱测定方法。

  方法 采用气相色谱内标法,FID检测器,硅酮OV-17填充柱(2m×3.2mm),柱温250℃,进样口温度280℃,监测器温度300℃。

  结果 角鲨烯在1.2~19.2μg内呈良好的线性关系,加样回收率为99.8%。

  结论 该方法简单可靠,精度高,适用于角鲨烯软胶囊中角鲨烯的含量测定。

  【关键词】 角鲨烯 气相色谱法

  角鲨烯(squalene),又名鲨烯,鲨萜,是一种高度不饱和烃类化合物,具有提高体内超氧化物歧化酶活性、增强机体免疫力、抗衰老等多种生理功能[1],因此被广泛应用于医药、化妆品等相关领域[2]。

  本文以气相色谱内标法检测角鲨烯含量,用现代分析技术建立了角鲨烯质量控制方法。

  1 仪器与试药

  岛津GC-14C气相色谱仪;电子分析天平(MettlerToledo AB204-N);角鲨烯(中国药品生物制品检定所,批号140721-200601);角鲨烯软胶囊(北京赛鲨力生物技术研究中心,批号071201);正己烷为分析纯。

  2 方法和结果

  2.1 色谱条件

  色谱柱为硅酮OV-17填充柱(2m×3.2mm);检测器为FID检测器;柱温:250℃;进样口温度为280℃;检测器温度为300℃;载气为氮气,流速为50ml·min-1;空气流速50ml·min-1;氢气流速50ml·min-1;进样量3μl。

  2.2 溶液的制备

  2.2.1 内标溶液的制备

  精密称取鲨烷0.0604g,置于100ml容量瓶中,加正己烷稀释至刻度,摇匀,作为内标溶液。

  2.2.2 对照品溶液的制备

  精密称取角鲨烯对照品0.2002g,置于25ml容量瓶中,加内标溶液稀释置刻度,摇匀,作为对照品贮备液。

  精密吸取3.0ml对照品贮备液,置10ml的量瓶中,加内标溶液稀释置刻度,摇匀,作为对照品溶液。

  2.2.3 供试品溶液的制备

  精取角鲨烯软胶囊内容物0.0252g,置于10ml的量瓶中, 加内标溶液稀释置刻度,摇匀,作为供试品溶液。

  2.2.4 阴性对照溶液的制备

  取内标溶液作阴性对照溶液。

  2.3 方法学考察

  2.3.1 专属性试验

  照上述色谱条件,取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各3μl,分别注入色谱仪。

  供试品色谱图中,在与对照品色谱图相应的位置上,显相同保留时间的色谱峰,阴性对照溶液在此保留时间内无色谱峰,本测定无干扰。

  角鲨烯出峰时间约9.873min,内标出峰时间约4.265min。

  见图1。

  2.3.2 线性关系考察

  分别精密吸取对照品贮备液0.5、1.0、2.0、4.0、8.0ml置10ml的容量瓶中, 各加入内标溶液稀释置刻度,摇匀,依次进样3μl,测定色谱峰面积,以对照品与内标峰面积积分值的比作为横坐标(X), 对照品溶液溶质的质量(mg)作为纵坐标(Y), 进行线性回归,得回归方程Y=0.5947X+0.0473, r=0.9994,结果表明角鲨烯在进样量范围1.2~19.2μg内呈良好的线性关系。

  2.3.3 精密度试验

  取供试品溶液,连续重复进样6次,每次3μl,以供试品溶液与内标溶液峰面积积分值的比值计算相对标准偏差,测得平均值为0.9032,RSD=0.66%,表明精密度良好。

  2.3.4 重现性试验

  称取同一批号的供试品6份。

  各约25.0mg,依上述2.1项色谱条件进行测定,以角鲨烯的百分含量(g/g)计算相对标准偏差,平均含量为99.82%,RSD=0.58%,重复性良好。

  2.3.5 稳定性试验

  精密吸取供试品溶液3μl,经过0、1、2、3、4、5h分别依上述2.1项色谱条件进行测定,以供试品溶液与内标溶液峰面积积分值的比值计算相对标准偏差,测得平均值为0.9149, RSD=1.16%,结果表明5h内样品稳定性良好。

  2.3.6 回收率试验

  分别精密称取已测定含量的角鲨烯软胶囊内容物6份,每份约12.5mg,加对照品贮备液2ml,各加内标溶液稀释置刻度,摇匀。

  按上述2.1项色谱条件定含量,计算回收率,平均回收率为99.8%,RSD=1.22%。

  2.4 样品含量测定

  取供试品溶液和对照品溶液各3μl, 注入气相色谱仪,按照上述色谱条件进行测定,内标法计算样品含量,结果供试品中角鲨烯平均含量99.8%。

  通过检测供试品装量,计算出每粒供试品中角鲨烯平均含量为0.1404g。

  3 讨论

  3.1 本实验采用气相色谱内标法对角鲨烯含量进行测定,并进行了方法学考察。

  实验结果表明本方法分离度高,方法可行,结果准确,可有效地控制角鲨烯软胶囊的质量。

  3.2 本实验方法也为含角鲨烯成分的药品及保健品质量标准建立提供参考。

相关推荐