生物制药毕业论文

　　简要评述了利用转基因植物生产的药用蛋白种类和表达系统，利用转基因植物生产药用蛋白的研究现状、发展趋势，以及转基因植物生产药用蛋白的基本方法、应用研究等。尽管目前植物作为药用蛋白的生物反应器受到诸多因素限制，优点与问题并存，但利用转基因植物生产药用蛋白是植物基因工程研究领域的一个新的发展趋势。

　　引言

　　传统的生物医药基因工程常利用动物病毒、细菌、酵母等为生物反应器进行药用蛋白的生产，存在一些不足之处，如，细菌细胞不能进行许多病毒蛋白质的转录后的修饰作用，不利于蛋白质的正确折叠，导致其免疫性通常较弱;酵母菌对有些蛋白质的过分糖基化可能影响针对特定蛋白质的免疫反应，妨碍着酵母菌在一些疫苗生产中的应用;多数动物培养系统表达水平低，需要昂贵的生长培养基，且培养基需要特殊处理，因此疫苗成本很高，限制了其商品化应用。利用转基因植物作为生物反应器，把外源基因导入植物核基因组或叶绿体基因组中可以生产出在医学上有生物活性的药用蛋白，且可以克服其他反应系统的缺陷，成为药用蛋白生产的又一新途径。

　　1问题的提出

　　现代基因工程技术最初是建立在结构简单的微生物，尤其是大肠杆菌的基础之上的，最初都以大肠杆菌为受体表达外源蛋白，用转基因植物生产药用蛋白的思路出自偶然。八十年代末，比利时pgs公司的科学家将一个神经肽(enkephalin,脑啡肽)编码基因转入烟草中表达，用意在于让瘾君子们不用抽烟，只需拿烟叶闻一闻或放在口中嚼一嚼即可过烟瘾，以此减少尼古丁对人体的危害及减少空气污染。他们把这个小肽基因两端设计了两个蛋白酶的酶切位点，将改造后的基因串联导入烟草细胞并成功获得再生植株，结果小肽以多聚体的形式表达存在，用胰蛋白酶和羧肽酶作用后获得了神经肽，每粒种子在200nmol,然而，他们的目的最终没能达到，因为神经肽要经血液运输而起作用，在口腔及消化道内会被降解掉，但他们却意外地找到了一条转基植物生产神经肽的途径，引起人们对此领域的关注。运用相同的思路，美国scripps研究所分别克隆了抗体的重链和轻链基因并转入烟草中，然后使两种转基因烟草杂交，在子代烟草叶片中产生了大量的抗体蛋白，表达水平占叶片总蛋白含量的1.3%,从而开创了用植物生产人、畜用疫苗的新时代，用此法生产抗 体可大大降低成本，生产规模大，可缓解目前疫苗紧缺的局面[1]。

　　2利用转基因植物生产的药用蛋白种类的研究进展

　　迄今为止，国内外利用转基因植物生物反应器研究和开发的药用蛋白、酶等已达100种以上，其中在植物中成功表达的药用蛋白质和多肽有：人的细胞因子、表皮生长因子、干扰素、生长激素、单克隆抗体等。

　　2.1利用转基因植物生产的药用蛋白种类

　　2.1.1利用转基因植物生产动物口服疫苗

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　　动物口服疫苗是将病原微生物的抗原编码基因进行克隆重组，导入植物受体细胞进行表达，其表达产物无需纯化，连同植物组织一起口服后可激发动物粘膜免疫，机体产生对该重组蛋白的保护性中和抗体。1992年mason hs等首次报道了将乙型肝炎病毒表面抗原(hbsag)基因转入烟草中获得0.01%表达。1995年mason hs又将hbsag基因转入马铃薯中，并使其在块茎中专一性表达，用薯块饲喂小鼠，在小鼠体内检测到保护性抗体[2]。中国农业科学研究院生物技术研究所刘德虎等在马铃薯和番茄中成功地表达了乙肝表面抗原，将转基因马铃薯饲喂小鼠后，